廣州輝駿生物科技股份有限公司

主營:SILAC,iTRAQ,DIGE,雙向電泳,質(zhì)譜鑒定
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[供應(yīng)]siRNA載體構(gòu)建實(shí)驗(yàn)服務(wù)
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  • 產(chǎn)品產(chǎn)地:廣州
  • 產(chǎn)品品牌:輝駿生物
  • 包裝規(guī)格:D003
  • 產(chǎn)品數(shù)量:0
  • 計(jì)量單位:
  • 產(chǎn)品單價(jià):0
  • 更新日期:2024-07-22 15:18:08
  • 有效期至:2034-07-20
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siRNA載體構(gòu)建實(shí)驗(yàn)服務(wù) 詳細(xì)信息

一、siRNA載體構(gòu)建概述
    RNA干擾(RNAi)是一種運(yùn)用雙鏈RNA(dsRNA)分子實(shí)現(xiàn)基因的沉默,在植物和動(dòng)物中都廣泛存在的一種基因調(diào)控機(jī)制。導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)的雙鏈RNA在Dicer酶的作用下形成21-23核甘酸長siRNA,siRNA雙鏈結(jié)合一個(gè)核酶復(fù)合物從而形成RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合物(RNA-inducedsilencingcomplex,RISC)與mRNA結(jié)合誘導(dǎo)mRNA切割,從而調(diào)節(jié)基因的表達(dá)。其應(yīng)用于包括功能基因組學(xué)、藥物作用靶點(diǎn)篩選和細(xì)胞信號通路等研究中,并且逐步成為病毒性疾病、遺傳性疾病以及腫瘤等的基因治療研究的一種手段。


圖1:siRNA作用機(jī)制
     本公司siRNA載體技術(shù)服務(wù)的基本原理就是將表達(dá)siRNA的雙鏈DNA插入到啟動(dòng)子下面,導(dǎo)入細(xì)胞后,啟動(dòng)子啟動(dòng)siRNA的表達(dá)并在Dicer核糖核酸酶的作用下產(chǎn)生具有活性的siRNA。

 
二、目前siRNA的來源主要包括化學(xué)合成,體外轉(zhuǎn)錄,siRNA載體(質(zhì)粒載體或病毒載體)等,siRNA載體與其他方法相比,具有以下技術(shù)優(yōu)勢:
   1、siRNA載體是DNA,與RNA相比更加穩(wěn)定,易控制。
  2、含有GFP的siRNA載體可以更好的監(jiān)測轉(zhuǎn)染效率。
  3、siRNA載體上帶有篩選標(biāo)簽及篩選抗性基因,可用于穩(wěn)定細(xì)胞系的建立。
 
三、技術(shù)服務(wù)內(nèi)容
 1、siRNA載體的選擇:本公司的siRNA載體分為質(zhì)粒載體和病毒載體,同時(shí)載體上帶有GFP及篩選抗性基因可供選擇。
 2、設(shè)計(jì)siRNA序列:根據(jù)目的mRNA序列設(shè)計(jì)三條siRNA序列及陰性對照序列。
 3、模板合成:合成每條編碼siRNA的單鏈DNA模板,退火形成DNA雙鏈。模板鏈后面連接RNAPolyIII聚合酶轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn),且兩端分別設(shè)計(jì)酶切位點(diǎn)。
 4、空載體和模板酶切,連接、轉(zhuǎn)化及克隆鑒定。
 5、siRNA載體技術(shù)服務(wù)報(bào)告提交.

 

四、客戶提供:
    靶基因的mRNA序列、NCBI登陸號及所屬物種等與構(gòu)建siRNA載體相關(guān)的信息。

 

五、實(shí)驗(yàn)服務(wù)報(bào)告內(nèi)容
 1、siRNA載體及含該質(zhì)粒的細(xì)菌各一份;
 2、載體圖譜、測序結(jié)果各一份;
  3、siRNA載體技術(shù)服務(wù)所需試劑耗材、儀器設(shè)備、操作過程各一份;

 

六、實(shí)驗(yàn)服務(wù)周期及收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn):咨詢本公司

 

七、質(zhì)量承諾:保證構(gòu)建的siRNA載體沉默效率大于70%

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