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[供應]串聯(lián)親和純化/質(zhì)譜TAP/MS

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產(chǎn)品產(chǎn)地：廣州
產(chǎn)品品牌：輝駿生物
包裝規(guī)格：B004
產(chǎn)品數(shù)量：999
計量單位：個
產(chǎn)品單價：1
更新日期：2024-07-22 15:16:51
有效期至：2034-07-20
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串聯(lián)親和純化/質(zhì)譜TAP/MS 詳細信息

實驗目的：尋找靶蛋白的互作蛋白

服務(wù)簡介：
TAP/MS是Co-IP/MS的“近親”，兩者在尋找誘餌蛋白的互作蛋白以及純化互作蛋白的原理類似。不同的是TAP/MS引入了2個純化標簽（strep或SBP，flag），2步純化，能有效純化裂解液中的靶蛋白及其復合物，并使非特異性蛋白的數(shù)量降至較低水平。實驗組和對照組洗脫的蛋白分別做質(zhì)譜，從實驗組結(jié)果中扣除對照組中的蛋白，即可鑒定出與靶蛋白互作的蛋白。

技術(shù)優(yōu)勢：
1、TAP/MS鑒定到的互作蛋白是細胞內(nèi)與誘餌蛋白天然互作的，符合體內(nèi)真實生理情況，可信度高。
2、采用兩步純化，能有效減少非特異蛋白的結(jié)合。

服務(wù)內(nèi)容:
1、構(gòu)建Flag-strep（或Flag-SBP）雙標簽的靶基因表達載體；
2、包裝慢病毒感染目的細胞，做成過表達細胞株，WB檢測表達效果（基因大于2kb時，可能導致病毒滴度不足以感染細胞系，此時如需進行加藥篩選構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系，則周期預計延長3-4周）；
3、細胞總蛋白，經(jīng)streptactin樹脂（或strep磁珠）和anti-flag抗體兩步純化，并洗脫；
4、實驗組和對照組的洗脫液分別用胰酶酶解；
5、LC-MS/MS分析，獲得蛋白質(zhì)的定量、定性信息；
6、實驗組結(jié)果扣除對照組中的蛋白，即可得到與靶蛋白互作的蛋白。

服務(wù)項目客戶提供結(jié)果交付實驗周期TAP/MS1、誘餌基因的名稱、序列、物種等信息或者誘餌基因的cDNA模板等
2、待研究的細胞（保證細胞狀態(tài)良好）及其培養(yǎng)相關(guān)信息1、構(gòu)建好的慢病毒表達載體
2、穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系(如做了篩選)
3、實驗組和對照組蛋白的質(zhì)譜鑒定結(jié)果
4、數(shù)據(jù)分析結(jié)果預計2.5-3個月

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