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[供應(yīng)]親和純化/質(zhì)譜Affinity purification，AP/MS
- 產(chǎn)品產(chǎn)地：廣州
- 產(chǎn)品品牌：輝駿生物
- 包裝規(guī)格：B007
- 產(chǎn)品數(shù)量：999
- 計量單位：個
- 產(chǎn)品單價：1
- 更新日期：2025-02-24 10:49:29
- 有效期至：2035-02-22
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親和純化/質(zhì)譜Affinity purification，AP/MS
詳細信息
實驗目的：尋找靶蛋白的互作蛋白
AP/MS服務(wù)簡介：
與常規(guī)Co-IP實驗類似，只是親和純化法可不用引入抗體。將標簽（如SBP）與特定基因融合表達，融合蛋白用鏈霉親和素（strep）磁珠親和純化，經(jīng)生物素洗脫，即可得到蛋白復合物。將實驗組和對照組的洗脫蛋白分別做質(zhì)譜，在實驗組結(jié)果中扣除對照組中的蛋白，即可鑒定出與靶蛋白互作的蛋白。
AP/MS技術(shù)優(yōu)勢：
1、得到的互作蛋白是細胞內(nèi)與誘餌蛋白天然互作的，符合體內(nèi)真實生理情況，可信度高；
2、不用抗體“拉取”互作蛋白復合物，避免了抗體的污染；
3、所得洗脫液可直接酶解，進行質(zhì)譜，減少了跑膠引起的蛋白損失。
服務(wù)內(nèi)容:
1、構(gòu)建含SBP標簽的靶基因表達載體質(zhì)粒；
2、目的細胞中過表達帶標簽的誘餌蛋白，細胞裂解液做WB檢測表達效果；
3、用strep微珠進行蛋白復合物的純化和洗脫；
4、實驗組和對照組的洗脫液分別用胰酶酶解；
5、LC-MS/MS，獲得蛋白質(zhì)的定性信息；
6、結(jié)果分析與報告整理。
技術(shù)流程圖：
服務(wù)項目客戶提供結(jié)果交付實驗周期AP/MS1、誘餌基因的名稱、序列、物種等相關(guān)信息或誘餌基因的cDNA模板等
2、待研究的細胞（保證細胞狀態(tài)良好，易于用質(zhì)粒轉(zhuǎn)染）及其培養(yǎng)相關(guān)信息1、構(gòu)建好的真核表達載體
2、實驗組和對照組蛋白的質(zhì)譜鑒定結(jié)果
3、數(shù)據(jù)分析結(jié)果預計2-2.5個月
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