【原理】
本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原,樣本中的殘留物磺胺二甲基嘧啶與微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)其抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光值與其所含磺胺二甲基嘧啶的含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出殘留物磺胺二甲基嘧啶的含量。
【試劑盒技術(shù)指標(biāo)】
規(guī) 格:96孔/盒
靈 敏 度: 1ppb
檢測(cè)時(shí)間: 80min
樣本檢測(cè)下限:
雞 肉 / 肝、豬 肉 / 肝、雞蛋、蜂 蜜 ……………… 1 p pb
血 清、尿 液…………………………………………4ppb
牛 奶 ………………………………………… 2 0 ppb
樣本回收率
雞 肉/ 肝、豬 肉 / 肝…………………………90% ±10%
雞 蛋 ……………………………………65% ±10%
蜂 蜜、牛奶、血清 …………………………70% ±10%
試劑盒組成
1、微量測(cè)試孔:每條8孔,一板12條
2、標(biāo) 準(zhǔn) 液×6瓶:(1ml/瓶) 0ppb、 1ppb、3ppb、9ppb、 27ppb、 81ppb
3、酶標(biāo)記物 7ml ……………………………… 紅色帽
4、抗體工作液 10ml …………………………… 藍(lán)色帽
5、底物A液 7ml ………………………………白色帽
6、底物B液 7 ml………………………………黑色帽
7、終止液 7 ml ………………………………黃色帽
8、20X濃縮洗滌液40 ml………………………白色帽
2X濃縮復(fù)溶液 50 ml……………透明帽
【所用儀器、試劑】
具備的儀器:微孔酶標(biāo)儀、打印機(jī)、均質(zhì)器 、氮?dú)獯蹈裳b置、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g)
微量移液器:?jiǎn)蔚?0μl-200μl,100μl-1000μl、多道250μl
試 劑:乙酸乙酯、NaH2PO4?2H2O、Na2HPO4?12H2O、正己烷
【樣本前處理步驟】
樣本前處理須知
處理任何樣本時(shí),都必須注意:
(a)本試劑盒所檢測(cè)的組織樣本包括:動(dòng)物組織、禽類和水產(chǎn)組織。eg:雞、鴨、牛、兔、魚(yú)、蝦等。
(b)實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭。
(c)實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈,必要時(shí)可對(duì)實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行清潔,以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
樣本處理前需配制:
處理任何樣本時(shí),都必須注意:
(a)本試劑盒所檢測(cè)的組織樣本包括:動(dòng)物組織、禽類和水產(chǎn)組織。eg:雞、鴨、牛、兔、魚(yú)、蝦等。
(b)實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭。
(c)實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈,必要時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行清潔,避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
樣本前處理需配制:
配液1、0.02MPB緩沖液
稱取2.58g Na2HPO4?12H2O和0.44g NaH2PO4?2H2O加去離子水500ml溶解。
配液2、樣本復(fù)溶液:
將2×濃縮復(fù)溶液用去離子水以1:1?。?份濃縮復(fù)溶液+1份去離子水),用于樣本提取后 的復(fù)溶。
(a )動(dòng)物組織(肌肉、肝臟等)、雞蛋、蝦、魚(yú)等
1、稱取2±0.05g組織樣本于離心管中,加入6ml乙酸乙酯,充分混勻5min,于15℃,4000r/min以上速度離心10min;
2、移取3ml上清液至干凈的玻璃管中,于50℃氮?dú)饣蚩諝獯蹈桑?br />3、加入已稀釋好的復(fù)溶液1ml混勻,再用正己烷1ml混合30s。室溫4000r/min,離心5min,除去上層液;
4、取20μl下層用于分析。
樣本稀釋倍數(shù):1
注:在使用國(guó)家規(guī)定最高
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