植物種質(zhì)資源庫(kù)是指以植物種質(zhì)資源為保護(hù)對(duì)象的保存設(shè)施。至1996年, 全世界已建成了1 300余座植物種質(zhì)資源庫(kù), 在我國(guó)也已建成30多座作物種質(zhì)資源庫(kù)。種質(zhì)入庫(kù)保存類型也從單一種子形式, 發(fā)展到營(yíng)養(yǎng)器官、細(xì)胞和組織, 甚至是DNA 片段等多種形式。保護(hù)的物種也從有性繁殖植物, 擴(kuò)展到無性繁殖植物及頑拗型種子植物等。因此, 近年來新建的印度國(guó)家種質(zhì)庫(kù)和擴(kuò)建的美國(guó)國(guó)家種質(zhì)庫(kù), 都屬于綜合型保存設(shè)施, 包括低溫保存庫(kù)、試管苗保存庫(kù)和超低溫保存庫(kù)等。雖然IBPGR (International Board for Plant GeneticResources)曾推薦種質(zhì)資源庫(kù)的設(shè)計(jì)指南,但由于種質(zhì)資源庫(kù)建設(shè)是一項(xiàng)涉及多學(xué)科的系統(tǒng)工程,且目前我國(guó)還沒有種質(zhì)資源庫(kù)設(shè)計(jì)與建設(shè)規(guī)范,致使部分建成的種質(zhì)資源庫(kù)存在著一些問題。如貯藏冷庫(kù)的環(huán)境參數(shù)達(dá)不到設(shè)計(jì)要求 保溫層沒有形成封閉的整體,出現(xiàn)“冷橋” 0℃以下的貯藏冷庫(kù)地坪沒有采取防凍措施,地面凍脹,出現(xiàn)裂縫等,導(dǎo)致運(yùn)轉(zhuǎn)效率不高, 有的甚至還不能運(yùn)轉(zhuǎn)。目前有關(guān)討論介紹商業(yè)冷庫(kù)建造技術(shù)的文章不少,而專門討論植物種質(zhì)資源庫(kù)設(shè)計(jì)與建設(shè)報(bào)道卻很少。隨著植物種質(zhì)資源保存在我國(guó)越來越受到重視, 一些單位正在籌備建設(shè)植物種質(zhì)資源庫(kù), 以作為資源收集保存與利用的基礎(chǔ)平臺(tái)。為此,有必要就植物種質(zhì)資源庫(kù)的類型及特點(diǎn)、設(shè)計(jì)原則和技術(shù)參數(shù)要求,以及建設(shè)經(jīng)驗(yàn)作一概述,這對(duì)建設(shè)好我國(guó)植物種質(zhì)資源庫(kù)具有重要指導(dǎo)意義。
      種質(zhì)資源庫(kù)的類型及特點(diǎn)
      種質(zhì)是所有攜帶遺傳物質(zhì)的活體, 對(duì)于植物來說, 不僅包括種子, 還包括植株、根、莖、胚芽和細(xì)胞等等, 甚至是DNA 片段。依據(jù)保存種質(zhì)對(duì)象的不同,種質(zhì)資源庫(kù)又分為低溫種質(zhì)保存庫(kù)、試管苗保存庫(kù)和超低溫保存庫(kù),以及 D N A 庫(kù)等。
      1 低溫種質(zhì)資源庫(kù)
      我國(guó)1986年建成的國(guó)家種質(zhì)庫(kù)和2002年建成的“國(guó)家農(nóng)作物種質(zhì)保存中心”的保存設(shè)施就屬于該類型種質(zhì)資源庫(kù),其保存對(duì)象是產(chǎn)生正常型種子的植物種質(zhì)資源。我國(guó)已收集3.34×105份作物種質(zhì)資源存入國(guó)家種質(zhì)庫(kù)進(jìn)行長(zhǎng)期保存, 貯存數(shù)量居世界首位。低溫種質(zhì)資源庫(kù)主要由保存種子的冷庫(kù)和種子入庫(kù)前處理操作室兩部分組成。冷庫(kù)部分包括種質(zhì)貯藏庫(kù)和機(jī)房,冷庫(kù)一般是在磚混結(jié)構(gòu)的建筑內(nèi),用聚胺酯板再搭建而成,聚胺酯板起保溫隔氣作用。通過機(jī)房的制冷除濕機(jī)組向冷庫(kù)內(nèi)輸送冷氣,并通過庫(kù)內(nèi)蒸發(fā)器設(shè)備進(jìn)行除霜,從而使冷庫(kù)常年處于恒定的低溫低濕狀態(tài)。前處理操作室包括種子接納室、清選室、發(fā)芽室、干燥室、包裝室和含水量測(cè)定室等。低溫種質(zhì)資源庫(kù)又分為長(zhǎng)期庫(kù)和中期庫(kù), 國(guó)際植物遺傳資源研究所(InternationalPlantGeneticRe-sourcesInstitute,IPGRI)的專家推薦的長(zhǎng)期庫(kù)貯藏溫度為(-18 ± 2)℃、相對(duì)濕度(RH)< 65%, 種子貯藏含水量: 一般作物為5%~7%、大豆8%,貯藏壽命可達(dá)20年以上。中期庫(kù)貯藏溫度(4±2)℃, 相對(duì)濕度< 65%, 貯藏壽命5~10年(FAO/IPGRI, 1994)。
      2 試管苗保存庫(kù)
      植物體的每個(gè)細(xì)胞,在遺傳上都是全能的,含有發(fā)育所必須的全部遺傳信息。試管苗種質(zhì)庫(kù)即是依據(jù)此原理,通過利用組織培養(yǎng)技術(shù),用試管保存組織或細(xì)胞培養(yǎng)物方法,來有效地保存種質(zhì)資源材料。試管苗保存庫(kù)一般由保存庫(kù)、培養(yǎng)庫(kù)和組培操作室三部分組成。保存庫(kù)用于進(jìn)行試管苗中短期保存,培養(yǎng)庫(kù)用于擴(kuò)繁組培苗。組培操作室用于對(duì)野外采集的種質(zhì)材料進(jìn)行滅菌脫毒等處理。保存和培養(yǎng)庫(kù)的墻圍結(jié)構(gòu)需作保溫處理,并通過制冷及除濕機(jī)組來維持庫(kù)內(nèi)溫濕度的恒定,以滿足種質(zhì)培養(yǎng)和保存的要求。此外, 對(duì)通風(fēng)換氣條件要求較高, 庫(kù)內(nèi)進(jìn)口空氣須是過濾無菌的。保存庫(kù)作用是使組培苗處于緩慢生長(zhǎng)狀態(tài)而達(dá)到中短期保存目的,緩慢生長(zhǎng)是指改變培養(yǎng)物生長(zhǎng)的外界環(huán)境條件,使細(xì)胞生長(zhǎng)降至最小限度但不死亡,從而達(dá)到延長(zhǎng)繼代培養(yǎng)的時(shí)間。
      3 超低溫保存庫(kù)
      超低溫通常指溫度低于-80℃, 主要是液氮(-196℃)及液氮蒸汽。在如此低的溫度下保存生物材料, 其生理代謝活動(dòng)幾乎處于停止?fàn)顟B(tài),可降低甚至是抑制了種質(zhì)的遺傳變異,以保持生物材料的遺傳穩(wěn)定性。這在解決組織細(xì)胞繼代培養(yǎng)和自然界積累性的突變等變異,保存和搶救物種等方面有極其重要的作用,被公認(rèn)是進(jìn)行無性繁殖作物種質(zhì)資源長(zhǎng)期保存的理想途徑。超低溫庫(kù)是采用成熟的超低溫保存技術(shù),將經(jīng)過預(yù)處理的植物離體材料,放入裝有防凍保護(hù)劑的密封凍存管中,置于液態(tài)氮灌中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。超低溫保存庫(kù)主要設(shè)施是液態(tài)氮罐和液氮儲(chǔ)液塔,液氮罐是存放種質(zhì)進(jìn)行長(zhǎng)期保存的地方,液氮儲(chǔ)液塔是儲(chǔ)存液態(tài)氮源,通過連接管道可隨時(shí)向液態(tài)氮罐提供液態(tài)氮源,從而保證液態(tài)氮罐溫度恒定維持在-196℃。存放液態(tài)氮罐的房間通風(fēng)條件要好,液態(tài)氮儲(chǔ)液塔要建造在室外 。
      4 基因工程材料及DNA庫(kù)
      建立基因工程材料庫(kù)是為生物工程技術(shù)育種提供物質(zhì)基礎(chǔ),也為生物工程產(chǎn)品和中間材料的安全提供保障。DNA 庫(kù)重點(diǎn)是保存特有、珍稀、瀕危和野生的植物種質(zhì)材料?;蚬こ滩牧系谋4嬷饕捎蒙疃鹊蜏乇洹⒁旱屠鋬龈稍锉4娣椒?。其他一些基因工程材料如質(zhì)粒、DNA、RNA、蛋白和多肽等, 因是沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物分子化合物,通常用凍干保存就能達(dá)到很好的效果。用乙醇作為保存液, DNA和RNA在低溫條件下也能達(dá)到長(zhǎng)期保存的目的。DNA 保存庫(kù)的建設(shè)可采用超低溫保存、-20℃的凍干保存和深度低溫冰箱(-80℃)保存等方法。因此, 基因工程材料及DNA保存庫(kù)需配備液態(tài)氮罐和超低溫冰箱(-80℃以下), 另外可建-20℃的低溫冷庫(kù)。
 
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